冷冻胚胎和卵子

1.冷冻胚胎：在IVF治疗过程中，将取卵后培育的胚胎冷冻供之后移植使用，这称为冷冻保存。

2.冷冻卵子：即生育力保存，适用于可能还没有准备好要孩子的女性。例如，没有找到合适的伴侣，或医疗原因（例如接受癌症治疗）。随着女性年龄的增长，卵子的数量和质量都会下降（主要原因是卵子中的染色体过多或过少）。

25岁时，75%的女性卵子染色体正常。

35岁时，大约50%女性卵子染色体正常，

40岁时，大约 10-15% 的卵子染色体正常。

保存年轻且健康的卵子，女性可以按照自己的方式规划未来的生育。目前，全球多个国家（包括中国北京）已提供该项医疗服务。

3. 冷冻技术：目前，冷冻卵子和冷冻胚胎最先进的技术，是玻璃化冷冻技术，即使用氮气快速冷冻卵子和胚胎，这种快速冷冻方法可以防止卵子和胚胎的液体形成冰晶，破坏卵子和胚胎；另一种冷冻方法称为慢速冷冻或控制冷冻，因为冷冻的速度要慢容易形成冰晶，存活率较低。

卵子取出体外后，将放置在实验室提前准备好的胚胎培养液内培养，数小时后受精，一般把这天称为胚胎培养的第0天。美国的受精卵培养主要指更具活产潜力的囊胚培养，囊胚的培养通常需要5～7天。囊胚的培养是一项非常精细的工作，对实验室的软硬件设施和胚胎师的要求很高。

取精或取精手术

取精分自助取精，和手术取精。正常情况下，女方取卵当天，男方会被通知自助取精或提前冻精。医院设有独立的取精室，方便男士独立操作，保护隐私，如签证办理不成功或不能出国，可联系我们采取异地取精。手术取精：有以下多种方式

1.睾丸精子抽吸术 (TESA)：TESA 是一种使用细针头和注射器从睾丸中提取精子的方式。此过程需要局部麻醉，大约需要 20-30 分钟。TESA是接受过输精管结扎术的男性或无法在射精中产生精子但在睾丸中产生精子的治疗选择。

2.睾丸精子提取 (TESE)：TESE 是一种在显微镜下进行的外科手术，在睾丸的阴囊内做一个微小的切口，去除一小部分睾丸组织并提取有活力的精子。

3.显微附睾精子抽吸术 (MESA)：MESA是一种微创手术，包括做一个小切口以进入附睾，并使用显微镜帮助从附睾管中取出精子。MESA 由技术精湛的显微外科医生在全身麻醉下进行。

4.经皮附睾精子抽吸术 (PESA)：PESA 涉及将连接到注射器的针头插入附睾以轻轻去除液体。PESA 在局部或全身麻醉下进行，是阻塞性无精子症男性的一种治疗选择。

5.显微手术睾丸精子提取 (Micro-TESE)：显微 TESE 是在睾丸外壳上做小切口的手术，将其打开并检查内部是否有更有可能产生精子的区域，这项技术由显微外科技术高超的泌尿科医生完成。

洗精

精子清洗是将精子从精液中分离出来的过程，清洗过的精子再用于宫腔内授精(IUI) 和体外受精(IVF)，甚至还可用于降低HIV阳性男性传播HIV的风险，精子清洗包括去除精液中精浆、死掉的精子、炎症细胞、抗精子抗体和细菌等，是不育症治疗的标准程序。常用的精子洗涤方法有三种：

1.  基本洗涤法：是将培养液稀释精液标本并放置在离心机高速旋转，并收集沉淀的精子细胞团的方法。

2.  直接上游法：将培养液加到精液样本上方或下方，活动的精子会自动游泳到培养液里表面并收集的方法。少精子症男性（精子数量少的男性）、精子活动能力差的男性以及男性不育症男性不适用于该技术。

3.  密度梯度离心法：是将精液放置在不同密度梯度培养液的上方，在离心过程中由于活的精子、死的精子、白细胞及细菌等沉降系数不同而分离，以获得活动力至少为 90% 的精子样本。是目前美国最常用的“精子洗涤”方法。

受精

受精分单精子显微注射ICSI、自然受精、PICSI、IMSI、ISOLATION等多种受精方式。最常用的方法是：ICSI受精。

受精原理：自然受精也称常规体外受精，是将许多精子放入含有胚胎培养液的培养皿中，精子从头部释放一种称为透明质酸酶的酶，溶解包围卵子的颗粒细胞，使卵子授精的方法。这种受精方法需要多个精子，精子释放的透明质酸酶达到适合受精的浓度时，进一步溶解卵子透明带并进入内部；当第一个精子到达卵细胞时，卵细胞的透明带和膜发生变化，使其他精子无法进入，进入卵细胞的精子和卵子形成原核，最后融合。

注意：当精子出现 DNA 碎片超过15%，或精子正常形态低、运动能力低等情况时，需要咨询医生进行手术取精，或其他方法受精。

胞浆内单精子显微注射ICSI

是一种在显微镜下将针头插入卵子中注入精子的方法。这种方法适用于严重的男性不育症（无法获得常规试管婴儿所需的活动精子数量）和受精失败（试管婴儿无法受精）。

激光辅助孵化

受精卵被包裹在一个称为透明带的蛋白质外壳中。当有些胚胎的透明带增厚和僵硬时，受精卵很难分裂和孵化出来。在这种情况下，需要在卵周围的外层开一个小开口来帮助透明带的剥落，使受精卵更容易孵化并帮助生长胚胎着床的过程。

受精卵培养（养囊）

囊胚通常形成于卵子受精后的第 5~7天。研究证明，染色体正常的囊胚植入母体能获得更高的怀孕率、和降低流产率。

胚胎移植前遗传学检测PGT（PGS和PGD）

第三代试管婴儿的技术也称胚胎植入前遗传学检测PGT(preimplantation genetic testing)，指在IVF-ET的囊胚移植前，取囊胚（注意：必须是囊胚）的遗传物质进行分析，诊断是否有异常，筛选健康的囊胚移植，防止遗传病传递的方法。

技术：NGS三代是PGS目前最新、最成熟的技术（PGS共有FISH→ACGH→NGS三代）。

IVF实验室和胚胎学家

IVF实验室的环境、技术、设备，尤其是胚胎学家的专业技能，是培养高质量胚胎的重要因素。以美国活产率TOP10的某实验室为例：

1.空气：例如X诊所实验室中采用定制的空气净化系统，以确保最高的空气质量和严格的环境控制，以优化胚胎发育。这些系统不仅可以过滤掉颗粒物，还可以控制有害挥发性有机化合物 (VOC) 的水平和远低于建议的十亿分之一的产量水平。

2.温度、湿度和气体：胚胎需要模仿女性稳定的生殖环境中生长，尽量减少环境变化，避免对胚胎造成压力和影响其发育非常重要。如.X诊所在常规处理胚胎时，使用移动培养箱（改良的早产儿培养箱）来保持培养基（胚胎生长所在的液体）的恒定温度 (37°C)、湿度和气体环境。

3.质量控制：例如X对所有制造商制定的培养基和接触用品实施了额外级别的质量控制测试。这种额外的测试需要使用超灵敏生物测定，以确保培养基和接触用品对发育中的胚胎没有毒性。

4.孵化技术：当在显微镜下观察或处理胚胎时，许多实验室中会从培养箱中取出，然后简单地放在室内气氛中的加热表面上。X诊所的移动孵化器使胚胎师能够在规范和稳定的环境中执行大部分这些任务。

5.第7天活检：许多实验室不会在第 5 天之后培养胚胎，因为这个过程既需要大量劳动力，又需要额外的用品和费用。X诊所在第 7 天进行活检，以确保患者有尽可能多的胚胎可用于活检。

6.第二天ICSI技术：通常，取出卵子并在同一天对成熟卵子进行单精子显微注射ICSI。然而，有时卵子需要更多时间才能成熟，许多实验室不进行第二天的 ICSI，是因为它需要更多工作，和涉及额外的供应和费用，而且他们不相信它会产生高质量的胚胎。

胚胎学家：通常分为初级胚胎学家、高级胚胎学家，和IVF实验室主任。他们努力确保实验室是胚胎生长和储存的理想环境。

周期管理

主要是指女性患者 赴美前准备～到取卵手术完成，和赴美移植前检查～到移植手术完成，是试管婴儿中最重要的两个阶段。

1. 在美时间.促排期间：患者需要到诊所大约5～7次，每次间隔2～3天左右，在美时间大约12～16天左右（部分诊所约2～3个月，要求治疗前必须到诊所检查）

2. 在美时间.胚胎移植：移植周期大约20天左右，如移植前需要做宫腔镜、腹腔镜等检查，需要另外规划好时间。

3. 拿药和吃药打针：由于美国医药分家，仅有少部分诊所提供药物；大部分诊所会将药方开给诊所或患者指定的药房，由患者在收到医嘱后自行前往购买，这需要患者离开诊所后也能及时获取到医嘱，在药房下班前拿到药物。

4. 其他事项：按要求体检，建立医疗档案，初诊，治疗方案沟通和医疗时间计划，在美约见医生及见医生频率（解疑答惑是否充分），检查项目核对（护士业务的熟练度），医嘱的准确度和及时性（离开诊所后对医嘱有疑问的应急方案），超声波和手术疑问解答，胚胎培养报告解答与沟通，精子冷冻和遗弃，账单处理等等。  

IVM未成熟卵子培养

囊胚的等级

囊胚根据细胞总数，内细胞团（ICM）和滋养外胚层细胞的凝聚力，以及囊胚腔的扩张程度进行细分，细分为优质胚胎AA，良好胚胎 (AB/BA），一般胚胎（BB/AC/CA），和较差胚胎BC/CB/CC。质量越好染色体囊胚等级越高，染色体正常率越高。

例如.4AA，第一个数字表示胚胎已经进入扩张器。第2和3个字母代表内细胞团和滋养层细胞等级。当然，囊胚形成的天数也是判断其发育潜能的重要指标。

将经过体外培养的胚胎，在合适时机移植到女性子宫。研究证明：1、冷冻胚胎的移植活产率更高，即女性促排激素恢复正常后，再将胚胎解冻移植。2、植入前基因检测（PGT）需要冷冻囊胚，当患者身体准备好时，可以移植染色体正常的囊胚。染色体正常的囊胚不太可能导致流产，并且更有可能成功怀孕。

抽血验孕

抽血验孕：胚胎移植后第7天或12天左右（不同诊所要求不同）进行第1次抽血验孕，监测胚胎是否着床。

心跳检测：移植后30天左右。

足月生产：移植后8个月20天足月。

移植前准备

1. 子宫相关疾病筛查：为确保胚胎拥有健康的生长环境，顺利扎入子宫内肥沃的“土壤”继续发育。移植前，您可能会进行子宫输卵管造影 (HSG) ，宫腹腔镜等检查或治疗（评估子宫形状，是否存在肌瘤、息肉、疤痕组织等阻止卵子着床的物质），需要与医生提前沟通安排行程。

移植手术

移植当天，您将根据医生的要求憋尿（让充盈的膀胱帮助医生在超声波上更好地观察您的子宫）或排尿（不同医生要求不同），以确保您的胚胎放置在子宫中的最佳位置。

IVF治疗包括促排卵、受精卵培养、和胚胎移植至女性子宫。

1.  准备阶段

2.  促排卵